技術(shù)文章
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如今,大多數(shù)實驗室都使用商業(yè)DNA提取試劑盒,這些試劑盒使用硅膠自旋過濾法來獲得高質(zhì)量的DNA。這些可以快速有效地純化DNA(或RNA)。那么DNA提取試劑盒的原理是什么呢?讓我們一起來看看吧!一、RNA和DNA提取裂解:裂解公式可能因您要提取DNA還是RNA而異,但共同點是含有高濃度離液鹽的裂解緩沖液。Chaotropes(離液劑)的作用:Chaotrope會破壞氫鍵及疏水間的相互作用。離液鹽包括鹽酸胍、硫氰酸胍、尿素和高氯酸鋰。洗滌劑:除了離液劑外,裂解緩沖液中通常還有一...
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你知道ELISA試劑盒的原理是什么嗎?讓我們一起來看看吧!1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術(shù)發(fā)展成液體標本中微量物質(zhì)的測定方法。Elisa試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:Elisa檢測試劑盒、ElisaKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,Elisa生物試驗...
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根據(jù)試劑的來源和標本的性狀及檢測的具備條件的不同,所使用的檢測方法也不同,那么ELISA檢測方法有哪些呢?讓我們一起來看看吧!一、雙抗體夾心法測抗原雙抗體夾心法是將特異性抗體結(jié)合到固相載體上形成固相抗體,然后和待測血清中的響應抗原結(jié)合形成免疫復合物,洗滌后加酶標記抗體,與免疫復合物中的抗原結(jié)合形成酶標抗體-抗原-固相抗體復合物,加底物顯色,判斷抗原的含量。二、競爭法首先將特異性抗體包被于固相載體表面,經(jīng)洗滌后分成兩組:一組加酶標記抗原和被測抗原的混合液,另一組只加酶標記抗原,...
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基于NGS測序的諸多優(yōu)點,故此技術(shù)在全球測序市場上占有著絕對的優(yōu)勢位置,而新一代測序(NGS)文庫制備是一體化測序流程中的一個關(guān)鍵因素,那么什么是文庫構(gòu)建呢?讓我們一起來看看吧!基因文庫是儲存了某種生物的DNA片段的受體菌的集合體。文庫分為儲存全部DNA片段和部分DNA片段,前者叫基因組文庫,后者包括cDNA文庫。文庫構(gòu)建的基礎(chǔ)是將目標RNA或DNA制備成可以和測序儀器兼容的形式。從組織或者細胞中將DNA或RNA提取出來,并通過機械破碎或者是酶切法對其進行片段化。如果前面提取...
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你知道不同動物細胞或組織的蛋白質(zhì)抽提步驟是怎樣的嗎?讓我們一起來看看吧!一、培養(yǎng)的貼壁動物細胞的蛋白質(zhì)抽提步驟1.從貼壁細胞培養(yǎng)瓶中小心傾去培養(yǎng)液。2.預冷的PBS清洗貼壁的細胞2次,小心傾去PBS。3.配置含抑制劑的蛋白質(zhì)抽提試劑(1ml抽提試劑中加入5μl蛋白酶抑制劑混合液,5μlPMSF和5μl磷酸酶混合液)。4.細胞瓶中加入預冷的含抑制劑的蛋白質(zhì)抽提試劑(107個細胞中加入1ml抽提試劑;5×106個細胞中加入0.5ml抽提試劑),輕輕搖動5分鐘。5.用一預冷的橡膠和...
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